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前期管理(埋棒后20天)菌袋埋土后,主要为水分、通气、温度光照三要素的调节,要保持适宜的温度、湿度、光照和控制通风量,温度要保持在22—26T,空气相对湿度要保持在85%—90%,初期以保温为主,白天拉开一层遮阳网,接受光照,避免日光直射,增加土壤温度,中午气温过高时,应开窗通风,喷水降温。在汉中约15d原基便可零星露出土表。中期管理(埋棒后20—40d)气温上升,温差较大,白天注意降温,控制温度在22—28空气相对湿度要保持在90%—95%;晚间应放下薄膜减少温差。光照采用双层遮阳网控制,制造出闪烁型林下散射光。此阶段,菌原基生长较快,每2—3d要进行通风换气,灵芝对二氧化碳非常敏感,否则,会造成灵芝菌柄长、不开伞或畸形。在此期间要定苗修头,原基生长20d后海袋选留1株强势菌株,并对其上生长点进行修头,即修成马蹄形,利于商品外形一致,提高灵芝菌盖的商品率,一般次修完后10d,应再进行一次留株修头。
酶解法.酶解法通过利用几丁质酶、纤维素酶或溶壁酶等酶液的一种或多种,使灵芝抱子细胞壁中的成分降解,释放其有效成分.使用生物酶辅助提取灵芝酸A,终实现灵芝酸A的提取率达到0.54%. 溶菌法.利用生物和灵芝抱子一同发酵,让生物在发酵过程中降解灵芝抱子细胞壁.利用益生菌枯草芽抱杆菌、嗜酸乳杆菌与灵芝抱子进行液态发酵,终使得灵芝抱子破壁率达到85%以上.化学法化学法的优点与生物法较为相似;缺点是提取溶剂易导致有效成分变性,且溶剂残留不易去除.溶剂提取法.溶剂提取法利用“相似相溶”原理,使灵芝抱子在水、乙醇等溶剂中长时间浸泡或回流,从而使有效成分扩散到溶剂中.例如,Lee等8采用25%乙醇提取灵芝中的成分,终减压浓缩并定容至500mL保存,通过灵芝的25%乙醇提取物,研究其通过Nrf2/HO-1通路增强细胞的抗氧化作用,该方法对灵芝孢子的提取率较好.
免疫调节作用灵芝抱子在传统中药中用来调节免疫系统已有较长历史.Pan等閔观察灵芝抱子多糖对甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱发胃癌大鼠的免疫性和抗氧化活性的影响发现,给予患胃癌大鼠灵芝抱子多糖后,可以降低血清和胃组织中脂质过氧化产物水平,并使胃癌所致的血清SOD、CAT和GSH-Px水平趋于正常,表明灵芝抱子多糖具有一定的免疫调节作用和抗氧化作用.实验发现,灵芝抱子可以提高ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,增强SR-BC诱导的小鼠足肿胀,增加溶血空班数等,表明灵芝抱子主要通过作用于免疫细胞增强其活性,从而直接或间接调节机体免疫功能. 抗氧化作用灵芝的抗氧化作用与多糖有关,并与多糖的单糖组成、分子量有较大关系.Heleno等28在对灵芝不同部位多糖的提取中发现,灵芝菌丝体中提取的多糖含量,灵芝抱子中提取的多糖抗氧化活性,其DPPH率为0.15mg/mL,还原能力为0.69mg/mL,均比其他部位提取的多糖抗氧化能力强.Deepalakshmi 实验发现灵芝抱子的乙醇提取物表现出强烈的抗氧化活性,其体外抗氧化活性显示,灵芝抱子的乙醇提取物对ABST、DPPH、OH-、O2-的体外能力均较抗坏血酸低,但相差不大.
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